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薄層層析硅膠板層析法基礎知識

來源: 時間:2021-07-01 09:54:04 瀏覽次數(shù):

一. 薄層層析法基礎知識:(硅膠板
硅膠板
薄層層析又叫薄板色譜,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固-液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點,一方面適用于少量樣品(幾到幾毫克,甚至0.01毫克)的分離,另一方面再制作薄層板時,把吸附層加厚加大,又可用來精致樣品,此法特別適用于發(fā)揮性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。

二. 色譜條件:

(1).固定相選擇:

柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相,分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同。

一般用于薄層色譜時,要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區(qū)分為色譜級(用于柱色譜)和薄層色譜級(用于薄層色譜)。

(2).展開劑選擇:

薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜一樣,主要根據(jù)樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮,展開劑

的極性越大,對化合物的洗脫力也越大。

選擇展開劑時,除參照表列溶劑性來選擇外,更多地采用實驗的方法,在一塊薄層板上進行實驗:

①. 若所選展開劑使混合物中所有的組分點都移到了溶劑前沿,此溶劑的極性過強。

②. 若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點移動,留在了原點上,此溶劑的極性過弱。當一種溶劑不能很好地展開各組分時,常選擇用混合溶劑作為展開劑,先用一種極性較小的溶劑為基礎溶劑展開混合物,若展開不好,用極性較大的溶劑與前一溶劑混合,調整極性,再次試驗,直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需要多次仔細選擇才能確定。

(3).相對移動值:從點樣原點開始到展開后的溶劑前沿,是溶劑的移動距離,記為l1,混合物中個組分的移動距離分別記為l1,l2,l3...在不同的展開條件下,各化合物的移動距離不會相同,而在同一條件下,相對于展開劑的移動距離,各化合物有可比較的展

開數(shù)據(jù),稱為相對移動值會比移值:Rf=l1/l0,在相同條件下測得的比移值可以作為化合物的薄層色譜特征值進行比較對照


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